試劑盒的各個操作步驟注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果??捎米鱁LISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。
試劑盒的使用規(guī)范如下:
1、樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
2、血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
3、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)查驗的各領(lǐng)域中。
4、要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
5、冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻也應(yīng)留意,不要進(jìn)行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。